Материалы научно-тематической конференции "Кишечный микробиом: профилактика нарушений и пути коррекции" (Москва, 4 июня 2024 г.). Часть 2

ГЛАВНЫЙ РЕДАКТОР

академик РАН Тутельян В.А.

РЕДАКЦИОННЫЙ СОВЕТ

академик РАН Долгушкин Н.К., академик РАН Никитюк Д.Б., доктор биологических наук Ефимочкина Н.Р., профессор Погожева А.В., профессор Тармаева И.Ю., кандидат биологических наук Вржесинская О.А.

Авторы несут ответственность за содержание статей и сам факт их публикации. Редакция не всегда разделяет мнение авторов и не несет ответственность за недостоверность публикуемых данных.

Королев А.А., Никитенко Е.И., Несвижский Ю.В.

Изучение влияния кальция на кишечный микробиоценоз

ФГАОУ ВО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-025

Введение. В поддержании оптимального микробиома кишечника ведущую роль играет алиментарный фактор. Именно сбалансированный рацион обеспечивает профилактику дисбиоза кишечной микрофлоры, а его отдельные компоненты могут регулировать состав микробиоценоза и поддерживать его оптимальные характеристики в различных условиях. В связи с этим особый интерес представляет пробиотический потенциал кальция, который активно изучается как важнейший микронутриент, а также как активный компонент профилактических пищевых композиций.

Цель - изучение влияния различных уровней алиментарного кальция на микрофлору толстой кишки лабораторных животных.

Материал и методы. Экспериментальные исследования проводили на белых крысах-самцах линии Вистар с массой тела 195±5 г. Животные были разделены на 3 группы по 20 крыс в каждой, их содержали на полусинтетическом казеиновом рационе с различными уровнями кальция: контрольная группа - норма кальция, 1-я опытная группа - дефицит кальция (за счет исключения кальция из минеральной смеси), 2-я опытная группа - двойная норма кальция (за счет введения дополнительного количества карбоната кальция). На 15-й и 30-й дни эксперимента от каждой крысы в обменных клетках отбирали кал для стандартного бактериологического исследования.

Результаты. Кальций пищевого рациона оказывает значимое влияние на структуру и динамику кишечного микробиоценоза крыс. Глубокий дефицит кальция в рационе животных 1-й опытной группы привел к выраженному дисбактериозу, характеризующемуся, с одной стороны, снижением бифидо- и лактобактерий, а с другой - ростом условно-патогенной и сапрофитной микрофлоры (стафилококков и лактозонегативных энтеробактерий, кишечных палочек). Установлено поступательное достоверное снижение количества бифидобактерий в 1-й опытной группе по сравнению с контролем на 18 и 42% на 15-е и 30-е сутки наблюдений соответственно. При этом параллельно со снижением эубиотической флоры в те же сроки наблюдения достоверно выросло количество стафилококков на 25 и 41%, и, особенно выраженно, лактозонегативных эшерихий - в 1,2 и 2,7 раза. Последнее на фоне стабильного количества лактозопозитивных эшерихий в течение всего эксперимента привело к развитию существенного дисбаланса в структуре кишечных палочек. В 1-й опытной группе отмечена также тенденция к росту энтеробактерий на 11 и 20% соответственно. У животных 2-й опытной группы к 30-м суткам наблюдения отмечен рост числа лактобактерий на 9,6% (р>0,05). В то же время повышенное в 2 раза количество кальция в рационе привело к умеренным дисбиотическим изменениям: снижению количества бифидобактерий на 23% при параллельном росте лактозонегативной флоры: эшерихий и энтеробактерий на 16 и 6% соответственно.

Заключение. Экспериментальные исследования показали негативное влияние дефицита кальция в рационе крыс на кишечный микробиоценоз. Алиментарный дефицит кальция существенно изменяет структуру микробиома, снижая его пробиотический потенциал. Таким образом, подтверждена важность обеспечения нормативного поступления кальция с рационом, не только с позиций нормализации минерального обмена, но и с точки зрения профилактики кишечного дисбиоза. Неоднозначное влияние на микрофлору кишечника повышенного до 2 физиологических норм поступления кальция (за счет карбоната кальция) требует дальнейшего изучения и обязательного учета, в том числе при разработке и медико-биологической оценке новых обогащенных и специализированных пищевых продуктов для диетического (лечебного и профилактического) питания.

Крупин Н.О., Закревский В.В.

Связь дисбиоза с различными типами питания

ФГБОУ ВО СЗГМУ им. И.И. Мечникова Минздрава России, Санкт-Петербург, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-026

Введение. Питание является одним из определяющих факторов в формировании качественного и количественного состава микробиоты кишечника, а значит, различные диеты и типы питания можно использовать для коррекции клинических проявлений дисбиоза.

Цель - установить наличие или отсутствие связи между типом питания и развитием клинической картины дисбиоза.

Материал и методы. Проведено анкетирование для установления связи между типом фактического питания и наличием различных клинических симптомов дисбиоза кишечника. В исследовании приняли участие 29 человек в возрасте 21 года - 53 лет.

Результаты. Оценивая данные из различных источников, авторы пришли к выводу о наличии связи между фактическим питанием и изменением качественного состава кишечной микробиоты, при котором можно говорить о развитии дисбиоза. Дисбиоз представляет собой снижение общего микробного разнообразия с выделением видов, в норме не встречающихся или встречающихся в минимальных количествах. Часто данные микроорганизмы способствуют развитию местной воспалительной реакции. К провоспалительным бактериям можно отнести представителей родов Enterococcus, Streptococcus, Escherichia, Bacteroides. Увеличение количества данных микроорганизмов и вероятности возникновения клинических проявлений дисбиоза возможно при употреблении в пищу животных белков, особенно говядины, насыщенных жирных кислот, сахаров. Данный перечень нутриентов характерен для западного типа питания. Снижению воспаления в кишечнике, нормализации его микробного состава способствуют пищевые волокна, растительные белки, полиненасыщенные жирные кислоты. Подобный состав макронутриентов чаще встречается в так называемой средиземноморской диете. Можно предположить, что приверженность западной диете способствует развитию дисбиоза, а средиземноморской - его предупреждению. Результаты анкетирования показали, что из 29 человек придерживаются западной диеты 2 человека, средиземноморской - 1, смешанной диеты с преобладанием западного типа - 13, смешанной с преобладанием средиземноморской - 13. При смешанном питании с преобладанием западного типа отмечались жалобы со стороны желудочно-кишечного тракта у 7 человек (метеоризм - 7, боли - 3, запоры - 3, диарея - 1). При смешанном питании с преобладанием средиземноморского типа жалобы выявляли у 8 человек (боли - 5, метеоризм - 7, запоры - 4, диарея - 2). У придерживавшихся средиземноморской диеты жалоб и признаков дисбиоза не было, а у потреблявших рацион западного типа - у 1 пациента были жалобы на боль и метеоризм. При коэффициенте достоверности 0,05 различия между заболеваемостью при различных типах питания были статистически не значимы.

Заключение. Приверженность типу питания не играет существенной роли в развитии дисбиоза. Для получения более достоверных результатов необходимо исследование с увеличением количества респондентов и проведением микробиологического посева.

Леонов Г.Е.¹, Вараева Ю.Р.¹, Ливанцова Е.Н.¹, Короткова Т.Н.¹, Стародубова А.В.^{1, 2}

Prevotella intermedia и Porphyromonas gingivalis: влияние на формирование сердечно-сосудистого риска у лиц молодого возраста с ожирением

¹ ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии", Москва, Российская Федерация

² ФГАОУ ВО РНИМУ имени Н.И. Пирогова Минздрава России, Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-027

Введение. Микробиом ротовой полости представляет собой сообщество бактерий, грибов, вирусов и простейших и насчитывает более 700 видов микроорганизмов. Дисбиоз микрофлоры ротовой полости может являться фактором риска многих заболеваний, включая сердечно-сосудистые, онкологические, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, сахарный диабет, ревматоидный артрит и др.

Цель - изучить взаимосвязь 2 основных представителей бактерий, ассоциированных с заболеваниями пародонта (Prevotella intermedia и Porphyromonas gingivalis), в формировании сердечно-сосудистых рисков у лиц молодого возраста.

Материал и методы. 49 пациентов (средний индекс массы тела 33,5±9,6 кг/м²; возраст 33,2±7,6 года; 34,6% мужчины; 22,4% курильщики). Собраны данные антропометрии, анамнеза, статуса курения, артериального давления, биохимического анализа (глюкоза, липидный профиль). P. intermedia и P. gingivalis идентифицировали c помощью полимеразной цепной реакции.

Результаты. P. intermedia и P. gingivalis были обнаружены у 40,8 и 18,3% участников соответственно. У пациентов с P. intermedia был повышенный индекс массы тела (35,2 против 29,1 кг/м²; р=0,037), более низкие уровни липопротеинов высокой плотности (1,4 против 0,9 ммоль/л; р=0,022) в сыворотке крови, более высокие значения SCORE (2,4 против 1,5; р=0,046). Наличие P. gingivalis было связано с более высоким систолическим артериальным давлением (135 против 120 мм рт.ст.; р=0,041).

Заключение. Коррекция факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний, особенно в молодом возрасте, способствует снижению заболеваемости и преждевременной смертности. Наличие некоторых пародонтопатогенов может быть связано с факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний и метаболическими нарушениями, включая ожирение, снижение уровня холестерина липопротеинов высокой плотности, повышение SCORE и артериального давления.

Леонова В.А.

Бифидогенные свойства кисломолочного продукта с добавлением метаболитного комплекса Lactobacillus helveticus

ФГАНУ "ВНИМИ", Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-028

Введение. В последние годы растет интерес к использованию метаболитных комплексов молочнокислых бактерий. Данные компоненты, известные как постбиотики, могут оказывать положительное воздействие на желудочно-кишечный тракт (ЖКТ) человека путем подавления патогенных микроорганизмов и стимуляции резидентных микроорганизмов ЖКТ, в том числе бифидобактерий. Метаболитные комплексы молочнокислых бактерий содержат смесь витаминов, экзополисахаридов и аминокислот. Данные компоненты стимулируют рост бактерий рода Bifidobacterium [1]. Ранее в лаборатории прикладной микробиологии и геномики микроорганизмов ФГАНУ "ВНИМИ" был получен метаболитный комплекс Lactobacillus helveticus 20T, проявляющий бифидогенные свойства [2]. Данный метаболитный комплекс использовали в качестве добавки в кисломолочном продукте.

Цель - исследование бифидогенных свойств кисломолочного продукта с добавлением полученного ранее метаболитного комплекса L. helveticus.

Материал и методы. Использовали сублимированный метаболитный комплекс L. helveticus [2]. Для получения кисломолочного продукта использовали закваску ХСТ (ассоциация L. helveticus и S. thermophilus), 1% которой и 1% метаболитного комплекса одновременно вносили в обезжиренное пастеризованное молоко. Заквашенное молоко выдерживали в термостате при 37±1 °C до образования сгустка. Бифидогенные свойства готового продукта исследовали по отношению к B. adolescentis (longum) MC-42 согласно ГОСТ Р 56201-2014. В качестве контроля использовали чистую культуру B. adolescentis MC-42.

Результаты. Результаты исследования бифидогенных свойств кисломолочного продукта представлены в таблице.

Заключение. Согласно полученным данным, кисломолочный продукт с добавлением метаболитного комплекса L. helveticus обладает бифидогенными свойствами. Через 24 ч инкубации количество в опытном образце B. adolescentis MC-42 увеличивалось на порядок по сравнению с контролем.

Литература

1. Morales-Ferre C., Azagra-Boronat I., Massot-Cladera M., Tims S., Knipping K., Garssen J. et al. Effects of a postbiotic and prebiotic mixture on suckling rats’ microbiota and immunity // Nutrients. 2021. Vol. 13, N 9. Р. 2975. DOI: https://doi.org/10.3390/nu13092975

2. Леонова В. А. Потенциальные пробиотические свойства и профили органических кислот метаболитного комплекса L. helveticus // Пищевая промышленность. 2024. № 1. С. 78-82. DOI: https://doi.org/10.52653/PPI.2024.1.1.015

Маркова Ю.М., Пилипенко В.И.

Изучение кишечной микробиоты у лиц с синдромом раздраженного кишечника методом секвенирования гена 16S рРНК

ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии", Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-029

Введение. Синдром раздраженного кишечника (СРК) - распространенное функциональное заболевание трудоспособного населения. При этом дисбиотические нарушения микробиоты кишечника являются одним из факторов, способствующих нарушению передачи сигнала по оси "кишечник-мозг" и поддержанию симптомов СРК.

Цель - изучение кишечной микробиоты при СРК.

Материал и методы. Изучен таксономический состав основных популяций микробиоты кишечника 49 лиц с СРК (8 мужчин и 41 женщина в возрасте 54,0±2,2 года), из них у 25 лиц был установлен диагноз СРК с диареей (СРКд), у 24 лиц - СРК с запорами (СРКз), группу сравнения составили 12 человек без симптомов СРК (3 мужчины и 9 женщин, средний возраст 52,7±3,4 года). ДНК, выделенные из образцов кала, исследовали методом секвенирования гена 16S рРНК с использованием системы "Ion GeneStudio S5 (Thermo Fisher Scientific) и набора Ion 16S™ Metagenomics Kit.

Результаты. При СРКд на уровне семейств наблюдалось достоверное (p<0,05) снижение индексов альфа-разнообразия (Chao1, Шеннона и Симпсона) по отношению как к показателям группы сравнения, так и группы с СРКз. Высокое микробное разнообразие способствует поддержанию кишечного гомеостаза, а снижение негативно отражается на стабильности сообщества и может служить причиной новых дисбиотических нарушений. Значимую долю в микробном сообществе составляли 4 основных филума: Firmicutes, Bacteroidetes, Proteobacteria, Actinobacteria, с меньшей других филумов: Verrucomicrobia, Tenericutes, Synergistetes, Lentisphaerae, Nitrospinae. У лиц с СРКз выявлено снижение филума Bacillota (Firmicutes) по отношению к группе сравнения и группе с СРКд (p<0,05), а также увеличение Pseudomonadota (Proteobacteria) по отношению к группе сравнения (p<0,05). При этом увеличение уровней факультативных анаэробных протеобактерий может свидетельствовать о нарушении анаэробиоза [1]. При обеих формах СРК было выявлено снижение Clostridiaceae и Rikenellaceae (p<0,05). Также у лиц с СРКд было обнаружено снижение Acidaminococcaceae, Bacillaceae, Porphyromonadaceae и увеличение Actinomycetaceae, а у лиц с СРКз - увеличение Enterobacteriaceae (p<0,05). Зафиксированы следующие однонаправленные изменения: снижение Alistipes (семейство Rikenellaceae), Barnesiella (семейство Porphyromonadaceae) (p<0,05), а также тенденция (p<0,1) к снижению Clostridium (семейство Clostridiaceae). Наряду с этим при СРКд снижалось содержание Roseburia (семейство Lachnospiraceae), Parabacteroides (семейство Porphyromonadaceae) и увеличивалось содержание Actinomyces (семейство Actinomycetaceae) и Eggerthella (семейство Coriobacteriaceae) (p<0,05). При СРКз была выявлена тенденция (p<0,10) к увеличению уровней Cronobacter (семейство Enterobacteriaceae) и более высокая частота их выявления (63%) по отношению к группе сравнения (25%).

Заключение. При разных формах СРК были выявлены как однонаправленные, так и разнонаправленные изменения микробного сообщества, что подтверждает участие микробиоты в патогенезе СРК и требует дальнейшего детального изучения, особенно с учетом данных о ее взаимосвязи с мозгом и центральной нервной системой.

Литература

1. Litvak Y., Byndloss M.X., Tsolis R.M., Bäumler A.J. Dysbiotic Proteobacteria expansion: a microbial signature of epithelial dysfunction // Curr. Opin. Microbiol. 2017. Vol. 39. Р. 1-6. DOI: https://doi.org/10.1016/j.mib.2017.07.003

Маркова Ю.М., Сидорова Ю.С., Петров Н.А., Полянина А.С.

Оценка влияния потребления функционального пищевого ингредиента на основе амаранта на микробиоту слепой кишки крыс на фоне беговой нагрузки

ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии", Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-030

Введение. В настоящее время не теряют актуальности разработка и подтверждение эффективности специализированных пищевых продуктов, обеспечивающих нутритивную поддержку при высоких уровнях физических нагрузок. Физические нагрузки оказывают влияние на кишечную микробиоту, а она - на физическую работоспособность [1]. В связи с этим одним из механизмов, обеспечивающих положительное влияние пищи на человека, может являться воздействие на микробиоту кишечника. Зерно псевдозлаковых культур, в частности амаранта, рассматривается как перспективное сырье для создания специализированной пищевой продукции, так как в последнее время появляются данные о его положительном воздействии на кишечную микробиоту и на здоровье в целом [2].

Цель - изучение кишечной микробиоты при воздействии амаранта.

Материал и методы. Проведено исследование in vivo на крысах-самцах линии Wistar. Животные были разделены на 3 группы (n=8): "Контроль" (интактные), а также "Бег" и "Бег + амарант", подвергавшиеся принудительной беговой нагрузке (Treadmill, PanLab) 5 дней в неделю на протяжении 36 сут. Крысы в группах "Контроль" и "Бег" получали стандартный полусинтетический рацион, а в группе "Бег + амарант" - модифицированный полусинтетический рацион с соответствующей заменой компонентов на белок амаранта (4%), экстракт из зерна амаранта (1%) и масло амаранта (1%). Микробиоту слепой кишки оценивали методом полимеразной цепной реакции с использованием тест-системы "Колонофлор премиум".

Результаты. У крыс, подвергавшихся принудительной беговой нагрузке, независимо от введения амаранта в рацион, снижалась частота выявления Ruminococcus spp. Также принудительная беговая нагрузка приводила к снижению уровня Roseburia inulinivorans филума Firmicutes, одного из основных продуцентов масляной кислоты [3]. При этом на фоне беговой нагрузки введение амаранта в рацион предотвращало снижение содержания указанной популяции, а также приводило к снижению уровней Enterococcus spp., уменьшению частоты обнаружения Enterobacter spp. (род, включающий в себя ряд условно-патогенных видов), увеличению частоты обнаружения и уровней содержания Prevotella spp., популяции, ассоциированной с ассимиляцией сложных углеводов [4].

Заключение. Добавление функционального пищевого ингредиента, полученного в ходе переработки зерна амаранта, приводило к увеличению популяций, участвующих в выработке короткоцепочечных жирных кислот, важных для поддержания здоровья и гомеостаза кишечника.

Финансирование. Работа выполнена при поддержке Российского научного фонда (грант № 21-76-10049 "Физиолого-биохимическое исследование эффективности новой специализированной продукции на основе комплексной переработки зерна амаранта").

Литература

1. Sales K.M., Reimer R.A. Unlocking a novel determinant of athletic performance: The role of the gut microbiota, short-chain fatty acids, and "biotics" in exercise // J. Sport Health Sci. 2023. Vol. 12, N 1. Р. 36-44. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jshs.2022.09.002

2. Ugural A., Akyol A. Can pseudocereals modulate microbiota by functioning as probiotics or prebiotics? // Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 2022. Vol. 62, N 7. Р. 1725-1739. DOI: https://doi.org/10.1080/10408398.2020.1846493

3. Scott K.P., Martin J.C., Chassard C., Clerget M., Potrykus J., Campbell G. et.al. Substrate-driven gene expression in Roseburia inulinivorans: importance of inducible enzymes in the utilization of inulin and starch // Proc. Natl. Acad. Sci USA. 2011. Vol. 108, Suppl. 1 (Suppl 1). Р. 4672-4679. DOI: https://doi.org/10.1073/pnas.1000091107

4. Chen T., Long W., Zhang C., Liu S., Zhao L., Hamaker B.R. Fiber-utilizing capacity varies in Prevotella-versus Bacteroides-dominated gut microbiota // Sci Rep. 2017. Vol. 7, N 1. Р. 2594. DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-017-02995-4

Минаева Л.П.

Микотоксины Alternaria и микробиота кишечника: характер взаимодействия

ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии", Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-031

Введение. Альтернариатоксины (АТ) представляют угрозу для здоровья человека вследствие высокого уровня встречаемости в свежих и обработанных пищевых продуктах (фруктах, овощах, крупах, орехах, семенах, маслах и т.д.) и токсических эффектов in vivo (тератогенные и фетотоксические эффекты) и in vitro (андрогенные, эстрогенные, генотоксические, мутагенные и кластогенные эффекты) [1, 2]. Микробиота кишечника (МБК), первый физиологический барьер и первая мишень для АТ, выступает как "микробный орган", играющий ключевую роль в метаболизме МТ, поступающих перорально [1].

Цель - оценка влияния АТ на МБК.

Материал и методы. Анализ научных публикаций в базах данных PubMed, NCBI.

Результаты. Проведена оценка влияния АТ на рост штаммов МБК человека in vitro. Исследование воздействия смеси АТ в виде экстракта (ЭАТ), включающего 11 видов: АОН, AME, ALT, ТЕА, ТЕN, ATX-I, ATX-II, ALP, STTX-III, ALS, AST, содержащихся в количествах 0,02-597 мг/г экстракта, на штаммы основных представителей микробиоты (Firmicutes/Bacillota, Bacteroidetes/Bacteroidota, Actinobacteria/Actinomycetota, Proteobacteria/Pseudomonadota и Verrucomicrobia/Verrucomicrobiota) показало различия в их чувствительности. Высокая внутриродовая вариабельность отмечена у видов Bacteroides в присутствии АТ: замедление роста B. vulgatus, B. eggerthii и B. thetaiotaomicron при отсутствии влияния на рост B. caccae и B. thetaiotaomicron; чувствительность также выявлена у Clostridium innocuum и Alistipes finegoldii, при этом Bifidobacterium longum и Escherichia coli были толерантны. В присутствии АТ выявлено снижение способности к образованию биопленок у E. coli и видов Bacteroides spp. Все это подтверждает потенциальное влияние АТ на состав и активность сложного микробного сообщества, населяющего кишечник человека [3]. Для микробных штаммов из кишечника человека показана их способность адсорбировать отдельные виды АТ: AST (Parabacteroides distasonis), AME (E. coli) и AOH (B. eggerthii). При этом способность АТ накапливаться на поверхности бактерий, особенно грамотрицательных штаммов, напрямую была связана с липофильностью этих АТ, тогда как АLТ, ТеА, ТEN и АLS обнаруживались только в растворенной форме, что может способствовать снижению свободно всасываемой доли АТ, поступающих с пищей [2, 3]. Все это указывает на важную роль МБК в модуляции токсичности АТ у человека. Штаммы B. eggerthii, P. distasonis и Bifidobacterium spp. химически модифицировали АТ путем деэпоксидирования высокореактивных эпоксидсодержащих ATX-II в ATX-I и STTX-III в ALP [3]. При этом профиль образующихся метаболитов АТ определяется не только химической структурой исходного соединения, но и комплексом ферментов, экспрессируемых в МБК, который варьирует индивидуально.

Заключение. Взаимодействие АТ и МБК имеет двунаправленный характер - модуляция микробиоты кишечника микотоксинами, что может иметь потенциальные последствия для кишечника и здоровья человека, и метаболизм микотоксинов микробиотой кишечника, с преобразованием их в форму с иной биологической активностью. Роль микробиоты кишечника необходимо учитывать в проводимой оценке риска здоровью человека в отношении АТ.

Литература

1. Jin J., Beekmann K., Ringø E., Rietjens I.M.C.M., Xing F. Interaction between food-borne mycotoxins and gut microbiota: A review // Food Control. 2021. Vol. 126. Р. 107998. DOI: https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2021.107998

2. Crudo F., Aichinger G., Mihajlovic J., Varga E., Dellafiora L., Warth B. et al. In vitro interactions of Alternaria mycotoxins, an emerging class of food contaminants, with the gut microbiota: a bidirectional relationship // Arch. Toxicol. 2021. Vol. 95, N 7. Р. 2533-2549. DOI: https://doi.org/10.1007/s00204-021-03043-x

3. Louro H., Vettorazzi A., López de Cerain A., Spyropoulou A., Solhaug A., Straumfors A. et al. Hazard characterization of Alternaria toxins to identify data gaps and improve risk assessment for human health // Arch. Toxicol. 2024. Vol. 98, N 2. Р. 425-469. DOI: https://doi.org/10.1007/s00204-023-03636-8

Мойсеенок А.Г.

Биосинтез пантотеновой кислоты микробиотой кишечника человека ограничен и функционально связан с метаболизмом витамина в макроорганизме

Институт биохимии биологически активных соединений НАН Беларуси, Гродно, Республика Беларусь

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-032

Универсальные свойства пантотеновой кислоты (ПК, витамин В₅), структурного компонента кофермента А (КоА) и ацилпереносящего белка, реализуются в энергетическом метаболизме всех микроорганизмов (>100) микробиоценоза кишечника человека (МКЧ), равно как в организме высших животных и человека, обеспечивая функционирование энтероцитов иммунной системы, защиту от многочисленных патогенов и ряда других КоА-зависимых реакций в различных органах и тканях.

Геном более 250 исследованных типов Bacteroidota (Bacteroidetes) и Pseudomonadota (Proteobacteria) ограничен в инициировании синтеза ПК de novo, тогда как ряд штаммов Bacillota (Firmicutes), например молочно- и бифидобактерий, определены аутотрофными. Экзогенный (пищевой) витамин В₅ необходим Actinomycetota (Аctinobacteria). Доминирующее представительство (до 90%) в микробной популяции Bacillota и Bacteroidota предполагает перекрестное потребление ПК для формирования пула КоА в МКЧ для метаболизма короткоцепочечных ацил-КоА (ацетат, бутират, пропионат и др.). Продуцентами ПК являются E. coli, Salmonella typhimurium, H. pylori, Bifidobacterium infantis, Bacteroides fragilis [1, 2].

Производное ПК - пантетин (ПТ, восстановленная форма пантетеин) известна как ростовой фактор лактобактерий (LBF) и, несомненно, отражает зависимость их популяции от внутрикишечной биотрансформации витамина В₅ или поступления ПТ с пищевыми продуктами.

Гидролиз ПТ до ПК катализируется пантетеиназой, но оба предшественника КоА могут усваиваться энтероцитами посредством транспортной системы SMVT (SLC5A6) в проксимальном отделе кишечника. S-сульфопроизводные пантетеина, а также дефосфо-КоА и КоА выявлены при культивировании бифидобактерий. Последние характеризуются пробиотическими свойствами, тогда как S-сульфопантетеин достаточно давно [3] оценен как потенциальный пребиотик.

Кроме того, результаты наших ранних исследований свидетельствуют о способности бифидобактерий поглощать L-формы S-сульфопантетеина, т.е. проявлять высокую рацемазную активность, что предполагает возможность применения рацемических форм в качестве пребиотиков для достижения бифидогенного и бутирогенного эффектов.

Участие МКЧ во внутриорганизменном балансе витамина В₅ у хозяина оценивается низко (индекс DRI по Magnusdottir и соавт. равен 0,078%), однако у мышей и крыс, подвергнутых воздействию антибиотиков или сукцинилсульфаттиазона, развивается манифестирующая недостаточность витамина В₅.

Прием повышенных дозировок ПК беременными приводит к изменению микробиоценоза: относительному увеличению Prevotella и Actinobacteria и уменьшению Bacteroides. Выявлен аналогичный эффект урежения Micoplasma. Следовательно, уровень обеспеченности витамином В₅ изменяет профиль МКЧ и биологические функции кишечных бактерий [1, 2]. Недавние исследования генов ключевого фермента биосинтеза КоА - пантотенаткиназы - выявили идентичность новой формы макроорганизма с бактериальным ферментом.

Литература

1. Uebanso T., Shimohata T., Mawatari K., Takahashi A. Functional roles of B-vitamins in the gut and gut microbiome // Mol. Nutr. Food Res. 2020. Vol. 64, N 18. Р. e2000426. DOI: https://doi.org/10.1002/mnfr.202000426

2. Wan Z., Zheng J., Zhu Z., Sang L., Zhu J., Luo S. et al. Intermediate role of gut microbiota in vitamin B nutrition and its influences on human health // Front. Nutr. 2022. Vol. 9. Article ID 1031502. DOI: https://doi.org/10.3389/fnut.2022.1031502

3. Мойсеенок А.Г. Пантотеновая кислота в питании человека и ее значение в стимуляции бифидофлоры кишечника // Вопросы питания. 1982. № 1. С. 9-17

Олейник О.А., Самойлова Ю.Г.

Сравнительная характеристика параметров биохимического анализа кала у подростков на фоне ожирения

ФГБОУ ВО СибГМУ Минздрава России, Томск, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-033

Введение. По данным современной литературы, наиболее важными метаболитами кишечной микробиоты являются короткоцепочечные жирные кислоты (КЦЖК): ацетат, пропионат и бутират. На животных моделях было показано, что они воздействуют на компоненты энергетического баланса, влияя на патогенез ожирения. В этом контексте изучение исходного содержания КЦЖК в содержимом толстой кишки и его взаимосвязей с инкретиновыми гормонами вызывает научный интерес с учетом роста заболеваемости ожирением в детском и подростковом возрасте.

Цель - изучение параметров биохимического анализа кала для оценки содержания КЦЖК и поиск взаимосвязей с секрецией инкретиновых гормонов.

Материал и методы. Было проведено одномоментное сравнительное исследование группы 74 детей с ожирением (SDS индекса массы тела >2 - основная группа) и группы 44 детей с нормальной массой тела (SDS индекса массы тела от -1 до 1 - группа сравнения), сопоставимых по полу, со средним возрастом 12,1 [10,8; 14,6] года. Биохимический анализ кала проводили методом газовой масс-спектрометрии на хроматографе с цифровым управлением параметрами режима и обработки данных ("Хромос ГХ-1000") в лаборатории "Гемотест", концентрации инкретиновых гормонов (GLP-1, GLP-2) определяли в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа.

Результаты. У детей на фоне ожирения зафиксировано статистически значимое уменьшение более чем в 2 раза абсолютного содержания уксусной кислоты (С2) до 1,3 [1,1; 2,29] мг/г и более чем в 3 раза пропионовой кислоты (С3): 0,345 [0,163; 0,52] мг/г по сравнению с показателями группы сравнения: 3,75 [2,3; 4,87] и 1,34 [1,2;1,65] мг/г соответственно. Еще более выраженное снижение (более чем в 5 раз) отмечалось у детей с ожирением для масляной кислоты (С4) - до 0,31 [0,186; 0,624] мг/г по отношению к показателю детей из группы сравнения -1,67 [1,56; 1,78] мг/г. Анализ расчетных показателей анаэробного индекса показал снижение в 1,3 раза 0,434 [0,362; 0,667] у детей с ожирением по отношению к показателю группы сравнения. В структуре КЦЖК в биообразцах обследованных групп преобладала уксусная кислота: у детей с ожирением 59%, у детей из группы сравнения - 51%. В структуре КЦЖК значимо не различалось между группами содержание пропионовой кислоты (у основной группы - 16%, у группы сравнения - 18%) и суммарное содержание ИзоСn (11 и 8% соответственно). Содержание масляной кислоты было значительно ниже у детей с избыточной массой тела и ожирением по сравнению с детьми с нормальной массой тела (14 и 23% соответственно). Соотношение содержания ацетат : пропионат : бутират в толстой кишке по абсолютным показателям в группе детей с избыточной массой тела и ожирением составило 4,2:1:1,1, в группе детей с нормальной массой тела - 2,8:1:1,3. Концентрация инкретиновых гормонов у подростков основной группы статистически значимо была снижена на фоне ожирения по сравнению с параметром детей из группы сравнения для GLP-1 (20 [17,3; 24,0] и 29,6 [24,9; 33,0] пг/мл соответственно, р<0,001) и для GLP-2 (102,95 [91,97; 149,15] и 506,1 [385,5; 698,7] пг/мл соответственно, р<0,001).

Заключение. Выявлено изменение функциональной активности микробиоты толстой кишки у подростков с ожирением в виде снижения уровня основных КЦЖК (масляная, уксусная, пропионовая), что может косвенным образом свидетельствовать о снижение в питании детей количества пищевых волокон. Дефицит бутирата сопровождался снижением секреции инкретиновых гормонов.

Ревякина В.А., Тармаева Н.А., Мухортых В.А., Ларькова И.А., Долженкова В.Г., Кувшинова Е.Д.

Микробиота кишечника и пищевая аллергия

ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии", Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-034

Введение. Роль микробиоты кишечника в становлении иммунной системы и поддержании иммунной толерантности ребенка при пищевой аллергии является актуальной проблемой последних лет.

Цель - изучить особенности микробиоты кишечника у детей с кожными проявлениями пищевой аллергии для разработки подходов для коррекции нарушений.

Материал и методы. Обследованы 100 детей в возрасте от 3 до 5 лет с кожными проявлениями пищевой аллергии, клиническим маркером которых был атопический дерматит. Среди обследованных больных было 43,0% девочек и 57,0% мальчиков. Всем пациентам проводили комплексное обследование с оценкой клинических симптомов, показателей аллергологического и иммунологического статуса. Использованы бактериологические методы идентификации микроорганизмов, биохимические (оценка метаболической активности кишечной микробиоты) и матрично-активированная лазерная дезорбционная/ионизационная времяпролетная масс-спектрометрия (MALDI-ToF MS). Данные методы позволяют установить родовую и видовую принадлежность микроорганизмов, а также выявить условно-патогенные бактерии в кишечнике у обследуемых пациентов.

Результаты. Средний уровень общего IgE в сыворотке крови у наблюдаемых детей составил 312,5±11,3 МЕ/мл. У большинства (98,0%) детей наблюдалась поливалентная пищевая аллергия. Исследование видового состава микробиоты кишечника показало, что основными видами микроорганизмов у пациентов были Bifidobacterium longum (56,7%) и Bifidobacterium animalis (25,0%). Среди лактобактерий чаще всего выявлялся Lactobacillus paracasei (30,0%), а остальные лактобактерии встречались с меньшей частотой.

При оценке метаболической активности кишечной микрофлоры отмечено повышение относительного количества уксусной кислоты при сниженном содержании пропионовой (С3) и масляной (С4) кислот (р<0,01). Выявлены низкие показатели ∑ (изоС4 + изоС5 + изоС6) и повышение соотношения изокислот к монокарбоновым кислотам (изоCn/Cn). Полученные данные свидетельствуют о снижении метаболической активности молочнокислой флоры (бифидо- и лактобактерий) и о появлении штаммов с измененными свойствами. Низкие уровни пропионовой кислоты указывают на нарушение синтеза биогенных аминов, которые блокируют адгезию патогенов. Снижение уровня масляной кислоты указывает на энергодефицит колоноцитов и является признаком недостатка в рационе питания пищевых волокон. Смещение окислительно-восстановительного потенциала внутрипросветной среды в сторону отрицательных значений свидетельствует о дисбалансе аэробных/анаэробных популяций микроорганизмов. Все эти изменения в микробиоте кишечника согласуются с наличием частых запоров, которые наблюдались у обследованных детей.

Заключение. Выявленные нарушения в микробиоте кишечника у обследованных детей свидетельствуют о низком микробном разнообразии и создают предпосылки для изменения иммунного гомеостаза и снижения защиты организма от внешних раздражителей. Появление пробиотиков нового поколения и назначение индивидуальных рационов питания, направленных на модифицирование кишечной микробиоты, дает возможность купировать симптомы болезни, влиять на иммунную систему организма и повышать качество жизни больного ребенка.

Русаков В.Н.

Взаимосвязь между щитовидной железой и кишечной микробиотой человека

ФБУН "ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора, Мытищи, Московская область, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-035

Введение. Микробиота кишечника составляет около 70% всей микробиоты, связанной со всеми микробными нишами человека. Недавние исследования показывают, что состояние кишечной микробиоты (КМ) имеет важное значение для здоровья щитовидной железы (ЩЖ).

Цель - анализ результатов исследований взаимосвязи между ЩЖ и КМ человека.

Материал и методы. Проведен поиск литературы по проблематике с использованием поисковых систем Web of Science, Scopus, PubMed.

Результаты. С появлением методов секвенирования расширились возможности в анализе состава КМ, связанной с развитием заболеваний ЩЖ у людей. В ряде оригинальных исследований анализируется состав КМ у пациентов с различными формами заболеваний ЩЖ. Кроме того, в некоторых работах исследовали взаимосвязь между КМ и микроэлементами, ответственными за гомеостаз ЩЖ, а также оценивали эффект воздействия про- и пребиотиков на КМ [1]. Установлено, что состав КМ у пациентов с тиреоидитом Хашимото значительно отличается от таковой у здоровых людей с точки зрения большего богатства и значительного альфа-разнообразия. Некоторые типы значительно коррелировали с уровнем ТТГ, а также с аутоантителами [2]. Большинство данных исследований, проводимых в Китае, свидетельствуют о снижении разнообразия КМ, а также соотношения Firmicutes : Bacteroidetes у пациентов с болезнью Грейвса. Результаты ряда исследований указывают на снижение КМ, продуцирующей бутират, как потенциальный признак рака щитовидной железы [1, 3]. Йод может менять видовой состав КМ, влияя как на резидентные, так и на патогенные бактерии из-за антимикробной активности. В условиях ограниченной доступности селена возникает конкуренция за его поглощение между резидентной микрофлорой и хозяином. Избыток или недостаток гормонов ЩЖ может изменить условия обитания микробов в кишечнике, способствуя нарушению их функций [1, 4, 5].

Заключение. Данные литературы свидетельствуют о сложной связи между КМ и функциональным и морфологическим гомеостазом ЩЖ, но недостаточны для установления четкой причинно-следственной связи в патофизиологии этих нарушений. Доказательств о влиянии пробиотиков и синбиотиков на КМ недостаточно, чтобы предложить регулярное использование этих соединений у пациентов с заболеваниями ЩЖ.

Литература

1. Virili C., Stramazzo I., Bagaglini M.F., Carretti A.L., Capriello S., Romanelli F. et al. The relationship between thyroid and human-associated microbiota // Rev. Endocr. Metab. Disord. 2024. Vol. 25, N 1. Р. 215-237. DOI: https://doi.org/10.1007/s11154-023-09839-9

2. Sturov N., Popov S., Kostenko A., Roitberg G. Characteristics of gut microbiota in autoimmune diseases of the thyroid gland and the methods of its correction // Archiv Euromedica. 2021. Vol. 11, N 2. Р. 48-61. DOI: http://dx.doi.org/10.35630/2199-885X/2021/11/2/21

3. Knezevic J., Starchl C., Tmava Berisha A., Amrein K. Thyroid-Gut-Axis: how does the microbiota influence thyroid function? // Nutrients. 2020. Vol. 12, N 6. Р. 1769. DOI: https://doi.org/10.3390/nu12061769

4. Fenneman A.C., Rampanelli E., Yin Y.S., Ames J., Blaser M.J., Fliers E., Nieuwdorp M. Gut microbiota and metabolites in the pathogenesis of endocrine disease // Biochem. Soc. Trans. 2020. Vol. 48, N 3. Р. 915-931. DOI: https://doi.org/10.1042/BST20190686

5. Qi X., Yun C., Pang Y., Qiao J. The impact of the gut microbiota on the reproductive and metabolic endocrine system // Gut Microbes. 2021. Vol. 13, N 1. Р. 1-21. DOI: https://doi.org/10.1080/19490976.2021.1894070

Русаков В.Н., Сетко А.Г.

Воздействие кадмия на микробиоту кишечника

ФБУН "ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора, Мытищи, Московская область, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-036

Введение. Кадмий (Cd) широко распространен в окружающей среде. Одной из составляющих механизма его токсичности является влияние на формирование микробиоты кишечника. Кишечник является первым барьером для усвоения Cd после перорального приема пищи и воды. Воздействие Cd увеличивает численность патогенных кишечных бактерий и нарушает микробную экосистему, что приводит к микроэкологическому дисбактериозу [1, 2].

Цель - анализ результатов исследований токсичного действия Cd на микробиоту кишечника и его профилактика.

Материал и методы. Проведен поиск литературы по проблематике с использованием поисковых систем Web of Science, Scopus, PubMed. Большинство исследований проведены на грызунах как case-control суб- или хронические эксперименты, в которых животные подвергались воздействию различных концентраций Cd [3, 4].

Результаты. Все исследования выявили нарушения состава микробиоты кишечника. Эти изменения характеризуются значительным снижением микробного биоценоза и численности бактерий, продуцирующих короткоцепочечные жирные кислоты, значительным ингибированием генных путей, связанных с метаболизмом аминокислот и углеводов, стимулированием метаболизма глутатиона и деградации аминобензоата. Воздействие Cd может снизить численность некоторых кишечных микробов, таких как Lachnospiraceae, Streptococccaceae, Prevotella и Lachnoclostridium, одновременно способствуя колонизации Coriobacteriaceae, Lactobacillaceae, Escherichia coli, Shigella [5]. Влияние Cd на микробиоту кишечника, по-видимому, зависит от времени; так, показано, что количество бифидобактерий уменьшалось, начиная с 1-й недели воздействия Cd, тогда как популяция лактобактерий демонстрировала значительное дозозависимое снижение после 3 нед воздействия [1]. Некоторые штаммы молочнокислых бактерий могут связывать и удалять тяжелые металлы, такие как Cd и свинец. Один из самых эффективных пробиотиков в этой области - Lactobacillus plantarum CCFM8610, в эксперименте проявляет высокую способность связывать Cd и защищать печень и почки мышей при острой интоксикации этим элементом [5].

Заключение. Микробиота кишечника служит важнейшим медиатором токсичности, вызванной Cd. Воздействие Cd увеличивает численность патогенных кишечных бактерий и нарушает микробную экосистему, что приводит к микроэкологическому дисбактериозу. Перспективный метод снижения токсичности Cd - применение пробиотиков.

Литература

1. Li X., Brejnrod A.D., Ernst M., Rykær M., Herschend J., Olsen N.M.C. et al. Heavy metal exposure causes changes in the metabolic health-associated gut microbiome and metabolites // Environ Int. 2019. Vol. 126. Р. 454-467. DOI: https://doi.org/10.1016/j.envint.2019.02.048
2. Liu S., Deng X., Li Z., Zhou W., Wang G., Zhan J., Hu B. Environmental cadmium exposure alters the internal microbiota and metabolome of Sprague-Dawley rats // Front. Vet. Sci. 2023. Vol. 10. Р. 1219729. DOI: https://doi.org/10.3389/fvets.2023.1219729
3. Breton J., Daniel C., Dewulf J., Pothion S., Froux N., Sauty M. et al. Gut microbiota limits heavy metals burden caused by chronic oral exposure // Toxicol Lett. 2013. Vol. 222, N 2. Р. 132-138. DOI: https://doi.org/10.1016/j.toxlet.2013.07.021
4. Bist P., Choudhary S. Impact of heavy metal toxicity on the gut microbiota and its relationship with metabolites and future probiotics strategy: a review // Biol. Trace Elem Res. 2022. Vol. 200, N 12. Р. 5328-5350. DOI: https://doi.org/10.1007/s12011-021-03092-4
5. Zhai Q., Wang G., Zhao J., Liu X., Tian F., Zhang H., Chen W. Protective effects of Lactobacillus plantarum CCFM8610 against acute cadmium toxicity in mice // Appl. Environ. Microbiol. 2013. Vol. 79, N 5. Р. 1508-1515. DOI: https://doi.org/10.1128/AEM.03417-12

Сафронова А.И., Тоболева М.А., Тимошина М.И.

Использование метапребиотического продукта в питании детей, влияние на микробиом

ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии", Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-037

Введение. Сохранение здоровья человека посредством модуляции микробиома с использованием фактора питания относится к числу активно развивающихся стратегий современной медицины. Результаты исследований указывают на способность диетологических вмешательств влиять на состав и метаболизм микробных популяций человека, таким образом воздействуя на здоровье индивидуумов, что легло в основу формирования различных научных концепций. Положительное влияние на состав микробиоты и характеристики стула у детей при получении олигофруктозы в отдельности и в сочетании с инулином из цикория были продемонстрированы в многочисленных исследованиях. Однако исследования у детей с неврологической патологией ограничены.

Цель - оценка влияния метапребиотического продукта на основе олигофруктозы на состояние кишечной функции и на метаболизм короткоцепочечных жирных кислот (КЦЖК) у детей с неврологической патологией.

Материал и методы. В исследование включены 32 ребенка с неврологической патологией, страдающие хроническими запорами и нарушениями кишечной микробиоты (13 мальчиков и 19 девочек) в возрасте от 6 мес до 6 лет (средний возраст детей составил 4,6±1,6 года). Обследованные пациенты были разделены на основную группу и группу сравнения. Детям основной группы дополнительно к основному варианту стандартной диеты назначали специализированный продукт, обладающий метапребиотическими свойствами. Наряду с оценкой антропометрических показателей и переносимостью продукта (включая частоту и характер стула) был проведен анализ метаболической активности анаэробной микрофлоры по содержанию летучих жирных кислот в кале методом газожидкостной хроматографии. Продолжительность исследования составила 2 нед.

Результаты. На фоне применения специализированного продукта с метапребиотическими свойствами у детей основной группы достоверно увеличилась частота стула с 0,61±0,25 раза в сутки в начале наблюдения до 0,93±0,11 раза в сутки в конечной точке исследования (р<0,05). В группе сравнения частота стула достоверно не изменилась (с 0,7±0,19 до 0,85±0,15 раза в сутки). При анализе данных биохимического исследования кала у детей основной группы отмечено увеличение абсолютного содержания КЦЖК C2-C4 (p<0,05). Статистически значимых изменений как в абсолютной, так и в относительной концентрации отдельных КЦЖК (уксусной, пропионовой и масляной кислот) ни в одной из групп не выявлено.

Заключение. Продукт, обладающий метапребиотическими свойствами, позволяет модифицировать микробиоту кишечника у детей с запорами в сторону восстановления качественного состава микроорганизмов (или тенденцию к восстановлению). Доказанные метапребиотические свойства продукта обеспечивают благоприятное влияние на функции кишечной микробиоты. Увеличение суммарного абсолютного содержания КЦЖК свидетельствует о повышении численности и активности представителей индигенной микробиоты, модификации ее качественного состава. Результаты проведенного исследования показали эффективность специализированного пищевого продукта с метапребиотическими свойствами у детей с неврологической патологией, страдающих хроническими запорами, в том числе с нарушениями кишечной микробиоты.

Светоч Э.А., Левчук В.П.

Профилактика экспериментальной сальмонеллезной инфекции у бройлерных цыплят с помощью пробиотика Lactobacillussalivarius 1090

ФБУН ГНЦ ПМБ, п. Оболенск, г.о. Серпухов, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-038

Введение. Профилактика сальмонеллезной инфекции у промышленной птицы остается актуальной для нашей страны. Один из эффективных способов борьбы с этой инфекцией - использование пробиотиков, активных против сальмонелл.

Цель - продемонстрировать эффективность штамма пробиотика Lactobacillussalivarius 1090 при экспериментальном сальмонеллезе у бройлерных цыплят.

Материал и методы. В качестве пробиотика использовали штамм L. salivarius 1090, выделенный из фекалий бройлерной птицы и показавший высокую антагонистическую активность в отношении сальмонелл и других грамотрицательных бактерий. Культуру пробиотика получали при культивировании штамма на среде МРС-бульон в ферментере с последующим концентрированием в 10 раз. Концентрат штамма разливали по пенициллиновым флаконам и замораживали для последующего использования в экспериментах. Экспериментальный сальмонеллез у бройлерных цыплят моделировали с помощью вирулентного штамма Salmonellaenteritidis 92 rifR при его пероральном введении. Эксперименты выполняли на бройлерных цыплятах возрастом 1-20 дней. Обсемененность паренхиматозных органов и фекалий цыплят сальмонеллой определяли высевом разведений исследуемого материала на средах с рифампицином.

Было проведено 2 эксперимента по изучению профилактической активности штамма пробиотика, в каждом использовали по 10 цыплят однодневного возраста в опытных и контрольных группах. Бройлеров опытных групп в течение первых 3 сут жизни выпаивали питьевой водой со взвесью клеток L. salivarius1090 в дозе 10⁸ клеток/особь. На 4-й день жизни цыплят опытных и контрольных групп заражали перорально культурой S. enteritidis 92 rifR в дозе 10⁸ клеток/особь. После заражения опытных групп цыплят им в течение 15 сут продолжали выпаивать взвесь клеток L. salivarius 1090. На 20-й день жизни цыплят выводили из опыта и определяли обсемененность селезенки, печени и фекалий на наличие в них S. enteritidis 92 rifR.

Результаты. Показано, что в органах и фекалиях опытных групп бройлеров возбудитель S. enteritidis 92 rifR отсутствовал, в то время как в паренхиматозных органах и фекалиях цыплят контрольных групп присутствовала культура S. enteritidis 92 rifR в концентрациях 10⁶-10⁸ КОЕ/г.

Заключение. Препарат пробиотика L. salivarius 1090 способен предотвращать развитие экспериментальной сальмонеллезной инфекции у бройлерных цыплят.

Сетко А.Г., Юскина О.Н.

Актуальные вопросы разработки и оценки специализированных кисломолочных продуктов с заданными профилактическими свойствами

ФБУН "ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора, Мытищи, Московская область, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-039

Введение. В биотехнологии ферментированных молочных продуктов используют разные группы микроорганизмов: молочнокислые, пропионовокислые, уксуснокислые бактерии, бифидобактерии, дрожжи, мицелиальные грибы, при этом наиболее важную роль играют молочнокислые микроорганизмы.

Цель - оценить эффективность специализированного пищевого кисломолочного продукта для диетического профилактического питания, обогащенного пептидным комплексом.

Материал и методы. Исследование проведено среди работающего населения (n=40), средний возраст обследованных основной группы составил 53,9±2,8 года, группы сравнения - 55,9±1,9 года, на базе клиники Института общей и профессиональной патологии имени академика А.И. Потапова ФБУН "ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора. Питание оценивали анкетно-опросным методом, с последующим использованием метода 24-часового воспроизведения питания [1]. Функциональное состояние и пищевой статус изучали с применением биоимпедансметра АВС-01 "МЕДАСС". Биохимические маркеры пищевого и метаболического статуса - с помощью прибора "Metrolab 2300". Оценку когнитивных и адаптационных характеристик проводили в соответствии с методикой САН [2] по Монреальской когнитивной шкале. Статистический анализ данных проведен с использованием программного обеспечения Statistica 13.0.

Результаты. В состав исследуемого специализированного пищевого кисломолочного продукта для диетического профилактического питания, обогащенного пептидным комплексом, входят выделенные мезофильные штаммы Lactococcuslactis ssp. Lactis, Lactococcuslactis ssp. Cremoris; специально отобранные штаммы Streptococcusthermophiles (Sacco System, Италия). Количество молочнокислых микроорганизмов, КОЕ в 1 г продукта - не менее 10⁷. По результатам проведенных исследований достоверно установлено, что в основной группе по сравнению с контролем выявлена "очень хорошая" переносимость специализированного кисломолочного продукта, подтверждаемая положительной динамикой улучшения биохимических маркеров сыворотки крови, положительными оценками органолептических характеристик, а также отсутствием признаков индивидуальной непереносимости и других побочных эффектов. У пациентов, употреблявших продукт, отмечено более эффективное снижение жировой массы, положительная динамика улучшения когнитивных способностей, психоэмоционального состояния, работоспособности и адаптационных характеристик.

Заключение. Разработка и оценка специализированных пищевых продуктов для диетического профилактического питания на сегодняшний момент являются наиболее перспективным направлением в поддержании и сохранении алиментарного статуса и трудового потенциала работающего населения.

Литература

1. Методические рекомендации по оценке количества потребляемой пищи методом 24-часового (суточного) воспроизведения питания. Москва, 2016. (Разработчик: ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии").
2. Методика САН [Электронный ресурс] URL: https://psytests.org/emo/san-run.html (дата обращения: 08.05.2024).

Сетко А.Г., Юскина О.Н.

Особенности проведения санитарно-эпидемиологической экспертизы при государственной регистрации биологически активных добавок к пище на основе пробиотических микроорганизмов

ФБУН "ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора, Мытищи, Московская область, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-040

Введение. Биологически активные добавки к пище (БАД) на основе пробиотических микроорганизмов широко представлены на рынке РФ и стран ЕАЭС, для их реализации необходимо свидетельство о государственной регистрации, которое выдается при наличии необходимых документов на продукцию и экспертного заключения на основании санитарно-эпидемиологической экспертизы.

Цель - уточнить и акцентировать некоторые особенности проведения санитарно-гигиенической экспертизы БАД на основе пробиотических микроорганизмов.

Материал и методы. Проведен анализ баз данных Единого реестра Евразийской экономической комиссии (http://www.eurasiancommission.org) и реестра свидетельств о государственной регистрации (http://fp.crc.ru; российская часть), а также санитарно-эпидемиологических экспертиз БАД.

Результаты. Пробиотические микроорганизмы - это живые непатогенные и нетоксигенные микроорганизмы - представители защитных групп нормального кишечного микробиоценоза здорового человека и природных симбиотических ассоциаций, поступающие в составе пищевой продукции для улучшения (оптимизации) состава и биологической активности защитной микрофлоры кишечника человека (Технический регламент Таможенного союза ТР ТС 021/2011. "О безопасности пищевой продукции"). Экспертиза БАД на основе пробиотических микроорганизмов включает рассмотрение документов (паспорт штамма с индивидуальным номером и информацией о депонировании в официальных коллекциях микробных культур национального или международного уровня, а также декларацию об отсутствии генетически модифицированных микроорганизмов), оценку информации, нанесенной на маркировку, описание и анализ пищевых компонентов, оценку результатов лабораторных исследований, подготовку заключения по результатам экспертизы. БАД должны соответствовать установленным в актах Союза требованиям безопасности пищевой продукции. Перечень основных биологически активных веществ, рекомендуемые и адекватные уровни потребления, а также верхние допустимые величины уровней суточного потребления для взрослых в составе БАД установлены в актах Союза [технических регламентах и/или Единых санитарно-эпидемиологических и гигиенических требованиях к продукции (товарам), подлежащей санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) (Приложение 5 "Величины суточного потребления пищевых и биологически активных веществ для взрослых в составе специализированных пищевых продуктов (СПП) и БАД к пище")]. Для пробиотических микроорганизмов в составе БАД такие величины установлены для бактерий рода Bifidobacterium, в том числе B. infantis, B. bifidum, B. longum, B. breve, B. adolescentis и др.; рода Lactobacillus, в том числе L. acidophilus, L. fermentii, L. casei, L. plantarum, L. bulgaricus и др.; рода Lactococcus spp., Streptococcus thermophilus в монокультурах и в ассоциациях с пробиотическими микроорганизмами; Propionibacterium shermanii в комплексе с пробиотическими и молочнокислыми микроорганизмами.

Заключение. Оценка пробиотиков в БАД является неотъемлемым компонентом при проведении их санитарно-эпидемиологической экспертизы.

Сидоренко А.Ю.¹, Сухина М.А.², Камбаров А.О.³

Влияние биоэкспрессоров на резистентность и антагонистическую активность штаммов индигенной микрофлоры кишечника

¹ АО "Торговый дом "Биоснабсбыт", Серпухов, п. Оболенск, Российская Федерация

² ФГБУ "ЦСП" ФМБА России, Москва, Российская Федерация

³ НИИ ПП и СПТ - филиал ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии", Московская область, п. Измайлово, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-041

Введение. Кишечная микробиота представлена широким видовым спектром микроорганизмов, обладающих различной эффективностью в сохранении гомеостаза макроорганизма. Наиболее эффективными принято считать автохтонные (аборигенные) и индигенные (постоянно присущие хозяину) виды. В силу влияния агрессивных факторов внешней среды (антибиотики, пищевые отравления, пищевые ксенобиотики и др.) индигенная микрофлора всегда подвержена угрозам подавления и вытеснения другими штаммами микроорганизмов, в том числе и патогенной природы.

Цель - разработка технологии получения аутопробиотиков, представляющих собой штаммы нормальной микрофлоры человека, изолированные от конкретного индивидуума, полученные на основе анаэробных и микроаэрофильных автохтонных и индигенных бактерий, входящих в базовую микрофлору кишечника хозяина, и предназначенные для восстановления нарушенной его кишечной микроэкологии.

Материал и методы. С целью повышения резистентности и антагонистической активности штаммов индигенной микрофлоры кишечника проведены исследования по влиянию добавок биологически активных веществ в питательную среду. Для этого штаммы микроорганизмов подвергали предварительному культивированию в анаэробных или микроаэрофильных условиях на питательной среде, содержащей добавки - биоэкспрессоры - для увеличения антагонистической активности против панрезистентной микрофлоры кишечника. В качестве добавки использовали ресвератрол, дигидрокверцетин, коэнзим Q₁₀ и селеновит. В качестве чистых линий были выделены следующие штаммы: Lactobacillus pentosus, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii и Lactobacillus fermentum. Всего было приготовлено 12 сред с различной концентрацией биоэкспрессоров. В качестве модельной панрезистентной культуры была выбрана культура Klebsiella pneumonia с множественной лекарственной устойчивостью.

Результаты. По результатам исследований установлено, что разработанная методика стимулирования отобранных штаммов выбранными биоэкспрессорами показала свою эффективность для штаммов Lactobacillus pentosus и Lactobacillus johnsonii. Эффективность биоэкспрессоров оценивали в баллах по ширине зоны задержки роста панрезистентной культуры Klebsiella pneumonia изучаемым штаммом кишечной микрофлоры. Для Lactobacillus pentosus эффективность биоэкспрессоров выстроилась в ряд по убыванию: селеновит - дигидрокверцетин - коэнзим Q₁₀ - ресвератрол. Для Lactobacillus johnsonii эффективность биоэкспрессоров выстроилась в ряд по убыванию: дигидрокверцетин - ресвератрол - селеновит - коэнзим Q₁₀.

Заключение. Показана возможность повышения антагонистической активности и резистентности в отношении патогенной микрофлоры автохтонных и индигенных микроорганизмов кишечной микробиоты путем культивирования на питательных средах с добавкой биологически активных соединений. Продемонстрирована избирательность воздействия на штаммы микроорганизмов различных биоэкспрессоров.

Смотрина Ю.В.

Изучение воздействия субингибиторных доз антимикробных веществ на представителей кишечной микробиоты у крыс

ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии", Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-042

Введение. Большая доля всех антимикробных препаратов в мире приходится на сельскохозяйственный сектор. Остаточные количества антимикробных препаратов базируются только на токсикологических эффектах. Влияние низких, в том числе субингибиторных, доз антимикробных веществ, используемых в животноводстве и в пищевой промышленности, на микробиоту кишечника изучено недостаточно.

Цель - изучение влияния субингибиторных концентраций тетрациклина, низина, активного хлора на фенотипические признаки антибиотикорезистентности (АМР).

Материал и методы. Исследование выполняли на крысах линии Вистар с исходной массой тела 100-150 г. В течение 4 нед животным перорально вводили сниженные по отношению к минимальным ингибирующим концентрациям (МИК) для Escherichia coli и Enterococcus faecium дозы хлортетрациклина (ХТЦ) или к минимальным технологическим концентрациям для низина и хлорамина в перерасчете на активный хлор. Субингибиторная доза (суб-МИК) для перорального введения на крысу составляла для ХТЦ 1/2 МИК, для низина - 0,015 мг, для активного хлора - 1 мг%; аггравированная доза для ХТЦ - 10×МИК, для низина - 0,45 мг низина, активного хлора - 10 мг% активного хлора на голову. Животные контрольных групп не получали антимикробных веществ. В изолятах энтеробактерий и энтерококков исследовали АМР диско-диффузионным методом к антимикробным препаратам 11 фармакологических групп (b-лактамные антибиотики, в том числе имипенем, цефалоспорины, фторхинолоны, хинолоны, аминогликозиды, гликопептиды, тетрациклины, нитрофураны, амфениколы, монобактамы, макролиды). Определяли наличие генов tet, кодирующих устойчивость к тетрациклину, методом полимеразной цепной реакции в реальном времени.

Результаты. Субингибиторные дозы ХТЦ способствовали формированию корезистентности к пенициллину и ципрофлоксацину. Количество АМР штаммов энтеробактерий в группах, получавших ХТЦ, было в 1,15-1,5 раза выше, чем в контроле. Частота встречаемости трансмиссивного гена tetM у энтерококков на субингибиторных дозах была 20%. Общее количество устойчивых к антибиотикам штаммов E. coli и E. faecium от крыс на обеих дозах низина в целом было в 1,8-4,4 раза выше, чем в контроле. Потребление суб-МИК индуцировало достоверно большую частоту устойчивых штаммов E. coli в кишечнике крыс к 5 группам антибиотиков (пенициллины, цефалоспорины, фторхинолоны, монобактамы, азитромицины), аггравированной - к одной (пенициллины). Частота обнаружения E. faecium, устойчивых к имипенему, ванкомицину, эритромицину, тетрациклину, превышала аналогичную в контроле (9,1; 27,0; 70,0; 9,1 против 0; 0; 50 и 0% соответственно). Были выявлены промежуточно-устойчивые штаммы только среди E. faecium к антибиотикам последнего резерва (имипенему). Суб-МИК дозы низина способствовали появлению у изолятов корезистентности: в 75% случаев у штаммов E. coli (одновременно к 2-5 антибиотикам, в том числе 1 штамм был устойчив сразу к 5 препаратам) и в 36% у E. faecium (к 2-3 антибиотикам). Почти все штаммы E. faecium в группе животных, получавших суб-МИК дозы активного хлора, имели устойчивость сразу к нескольким антибиотикам, среди них выявлены 2 мультирезистентых штамма E. faecium, устойчивых одновременно к 7-8 антибиотикам. Сопоставление профилей резистентности выявленных штаммов в группах, получавших разные дозы активного хлора, свидетельствовало о тенденции развития устойчивости на суб-МИК дозах активного хлора.

Заключение. Суб-МИК дозы ХТЦ влияют на формирование ко-резистентности к пенициллину и ципрофлоксацину у E. coli и E. faecium. Среди энтеробактерий количество резистентных штаммов в 1,15-1,5 раза выше, чем в контроле. Выявлена индукция АМР к критически важным для медицины высокоприоритетным препаратам - фторхинолонам, азитромицину, имипенему на суб-МИК низина (0,015 мг/мл), а также к корезистентности у 75% E. coli и у 36% E. faecium. На дозах суб-МИК активного хлора показана лишь тенденция развития АМР среди энтерококков.

Солнцева Т.Н.

Влияние метаболитов кишечной микрофлоры на функции митохондрий

ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии", Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-043

Введение. Митохондриальная дисфункция, как показали исследования, вовлечена в патогенез практически всех заболеваний. Активно изучается связь митохондрий с развитием возраст-ассоциированных заболеваний: нейродегенеративных (болезни Альцгеймера и Паркинсона), онкологических, сердечно-сосудистых заболеваний, сахарного диабета, синдрома хронической усталости, метаболического синдрома. Метаболиты микробиоты кишечника способны оказывать значительное влияние на функцию митохондрий [1].

Цель - изучение взаимодействия между кишечной микробиотой и митохондриями.

Материал и методы. Использовали интернет-ресурс российских и зарубежных медицинских изданий, в том числе PubMed, для доступа к полному тексту статей - сайты издательств Springer и Elsevier. Глубина поиска - 10 лет. Рассматривали источники информации (обзоры и оригинальные статьи), в которых освещены вопросы и обобщены результаты исследований влияния метаболитов микробиома на функцию митохондрий.

Результаты. Микробные метаболиты, такие как короткоцепочечные жирные кислоты (КЦЖК) и уролитин А, могут оказывать значительное влияние на функцию митохондрий. КЦЖК, особенно бутират, являются энергетическим субстратом дыхательной цепи. Бутират стимулирует биогенез митохондрий, способствует высвобождению противовоспалительных цитокинов (интерлейкин-10) и сигнального гормона GLP1, снижая поглощение энергии [2]. Важным метаболитом микробиома, влияющим на митохондрии, является уролитин А - это метаболит, образуемый некоторыми бактериями кишечника из эллаговой кислоты (содержится в гранатах, малине, орехах и др.). Уролитин А стимулирует процесс митофагии, обусловленной селективной утилизацией дисфункциональных митохондрий. Как правило, процессы митофагии нарушаются с возрастом. Восстановление правильного функционирования митофагии считается перспективной стратегией профилактики возраст-зависимых заболеваний. Кроме того, митофагия улучшает качество клеточного пула митохондрий и генерацию новых органелл, что приводит к улучшению митохондриальной функции. Другие метаболиты, например триметиламин, сероводород, аммиак, желчные кислоты и др., также оказывают влияние на митохондрии, включая мутацию мтДНК, окислительный стресс и митофагию, способствуя развитию вялотекущего воспаления. Это еще больше наносит ущерб клеточному гомеостазу и балансу врожденного иммунитета, усугубляя такие патологии, как атеросклероз [3].

Заключение. Микробные метаболиты могут влиять на функцию митохондрий, что открывает новые возможности профилактики митохондриальных нарушений путем воздействия на микробиом кишечника введением целевых пробиотиков и необходимых пищевых компонентов.

Литература

1. Damman C.J. Perspective: nutrition’s next chapter - bioactive gaps and the microbiome-mitochondria axis // Adv. Nutr. 2023. Vol. 14, N 3. Р. 420-425. DOI: https://doi.org/10.1016/j.advnut.2023.03.016
2. Bunt D.V., Minnaard A.J., El Aidy S. Potential modulatory microbiome therapies for prevention or treatment of inflammatory bowel diseases // Pharmaceuticals (Basel). 2021. Vol. 14, N 6. Р. 506. DOI: https://doi.org/10.3390/ph14060506
3. Li Y., Yang S., Jin X., Li D., Lu J., Wang X., Wu M. Mitochondria as novel mediators linking gut microbiota to atherosclerosis that is ameliorated by herbal medicine: A review // Front. Pharmacol. 2023. Vol. 14. Р. 1082817. DOI: https://doi.org/10.3389/fphar.2023.1082817

Теймуразов М.Г., Светоч Э.А., Абаимова А.А.

Получение и использование мундтицина Р436 в качестве биоконсерванта

ФБУН ГНЦ ПМБ, п. Оболенск, г.о. Серпухов, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-044

Введение. Бактериоцины - перспективный объект для использования в качестве биоконсервантов в пищевой промышленности. Так, низин рекомендован FDA для применения в качестве пищевого консерванта. Сейчас на доклинических и клинических испытаниях находятся еще 140 антимикробных пептидов. Основные причины, сдерживающие использование бактериоцинов в качестве биоконсервантов: безопасность штаммов-продуцентов, самих бактериоцинов, проблемы выделения и очистки бактериоцинов. Основные требования к самим субстанциям бактериоцинов - безвредность для биологических объектов, высокая антимикробная активность в отношении целевых микроорганизмов, активность в широком диапазоне рН среды, разных температурных режимах и активность при больших концентрациях солей.

Цели - разработать эффективный способ выделения и очистки мундтицина Р436; оценить антимикробную активность мундтицина invitro в отношении ряда важных грамположительных патогенов и микроорганизмов, вызывающих порчу пищевых продуктов; оценить эффективность мундтицина Р436 в качестве биоконсерванта мясной продукции.

Материал и методы. Мундтицин Р436 получали культивированием штамма-продуцента в бульоне с основой мясного экстракта и добавлением непосредственно в среду сорбента CM-Sephadex C25 (Cytiva). Далее сорбент набивали на колонку ХК-50 (Sityva), промывали и элюировали 0,5 М NaCl, pH 5,5. Белок определяли методом BCA. Чистоту определяли высокоэффективной жидкостной хроматографии (UHPLC EX1800), колонка С18 150×4,6 (Phenomenex). Для оценки перспективы применения бактериоцина Р436 в качестве биоконсерванта использовали куриный фарш и вареную колбасу. Навески по 25 г были обработаны 10 мл суспензии L. monocytogenes концентрацией 1×10⁶ КОЕ/мл, а затем обработали 10 мл рабочего раствора мундтицина в концентрации 40 нг/л. Экспозиция образцов при 4 и 25 °С составляла 1 ч, 1, 2, 3 и 4 сут.

Результаты. Предложен новый способ выделения и очистки мундтицина из культуральной жидкости с чистотой ~70% и выходом не менее 30 мг/л. Мундтицин Р436 обладает выраженной антимикробной активностью в нанограммовых количествах против культур рода Listeria (n=97), Cl. perfringens (n=38) и Enterococcus spp. (n=62), включая их антибиотикорезистентные варианты. Чувствительными к мундтицину были и грамположительные штаммы, вызывающие порчу пищевых продуктов (n=80). На моделях по деконтаминации мясной продукции от листерий показано, что применение мундтицина Р436 полностью элиминирует листерии и/либо снижает их содержание на 3-7 порядков в зависимости от вида примененной модели.

Заключение. Разработан новый способ выделения и очистки мундтицина из культуральной жидкости. Мундтицин Р436 обладает выраженной антимикробной активностью против культур рода Listeria, Cl. perfringens (n=38) и Enterococcus spp., а также грамположительных штаммов, вызывающих порчу пищевых продуктов.

Теплюк Д.А.^{1, 2}, Козлова А.Д.³, Сороколетов С.М.¹, Большаков С.А.¹, Шутов Е.В.^{1, 4}, Тутубалина Н.А.³, Тощаков С.В.³, Левина О.Н.¹, Павлов Ч.С.^{1, 2}

Особенности микробиома кишечника при неалкогольной жировой болезни печени в зависимости от степени стеатоза

¹ ГБУЗ ГКБ им. С.П. Боткина ДЗМ, Москва, Российская Федерация

² ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва, Российская Федерация

³ НИЦ "Курчатовский институт", Москва, Российская Федерация

⁴ ФГБОУ ДПО РМАНПО Минздрава России, Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-045

Введение. Четверть населения земли страдает неалкогольной жировой болезнью печени (НАЖБП), заболеваемость которой неуклонно растет. Ведется поиск новых модифицированных факторов риска развития и прогрессирования НАЖБП, в том числе обусловленных нарушением микробиома кишечника. Особое внимание уделяется качественному составу микрофлоры на разных стадиях заболевания

Цель - оценить особенности состава микробиома кишечника пациентов с НАЖБП в зависимости от степени стеатоза.

Материал и методы. Проанализировано 8 образцов кала пациентов с НАЖБП методом секвенирования гена 16S рРНК. В итоговой выборке присутствовало 320 ASV (Amplicon sequence variant - вариант последовательности ампликона), относимых к 98 родам. Пациенты были поделены на 2 группы: с низкой (S0 и 1) и высокой (S2 и 3) степенью стеатоза печени. Стеатоз печени определялся транзиентной эластографией с контролируемым параметром затухания ультразвуковой волны (CAP).

Результаты. Анализ бета-разнообразия, проведенный на расстоянии Эйтчисона, показал, что есть значимые различия между дисперсиями групп с разными степенями стеатоза печени (р<0,001). В свою очередь, анализ сравнения средних t.test’ом альфа-разнообразия не показал значимых отличий по коэффициентам Симпсона и Шеннона. Значимыми родами для группы пациентов с низкой степенью стеатоза были Esherichia-Shigella (отряд Enterobacterales), Ruminococcustorques (отряд Eubacteriales), Streptococcus (отряд Lactobacillales) и Lactococcus (отряд Lactobacillales). Для пациентов с высокой степенью - рода Bifidobacterium, Akkermansia вида muciniphilia. Отмечались группы микроорганизмов, характерные для обеих групп, например рода Blautia, Faecalibacterium, Agathobacter, Fusicatenibacter, Collinsella, Subdoligranulum, Anaerostipes, Dorea, Christensenellaceae, Roseburia, Lachnospiraceae, Coproccocus.

Заключение. У пациентов с разной степенью стеатоза печени отмечается значимое бета-разнообразие микрофлоры. Анализ альфа-разнообразия не показал значимых различий, вероятнее всего, ввиду недостаточной мощности исследования. Группа с низкой степенью стеатоза отличалась превалированием грамположительной флоры. Для пациентов с выраженной стадией стеатоза печени была характерна потенциально метаболически полезная микрофлора. Так, бактерия Akkermansia muciniphila, по данным литературы, отрицательно коррелирующая с НАЖБП, в нашем исследовании превалировала. Необходимы дальнейшие исследования в этом направлении.

Тоболева М.А., Гурченкова М.А.

Влияние смесей с лактулозой на состояние микробиома у детей раннего возраста

ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии", Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-046

Введение. Пребиотики необходимы для формирования здорового микробиома в детском возрасте. К наиболее изученным пребиотикам в детском питании с доказанной безопасностью относится лактулоза. Известно, что она не расщепляется в верхних отделах кишечника и, поступая в неизмененном виде в его нижние отделы, служит субстратом для роста бифидо- и лактобактерий. Исследования in vitro ферментации с участием фекальной микробиоты показали доминирование бифидобактерий среди микроорганизмов, метаболизирующих лактулозу в кишечнике. По значимости для физиологии хозяина основными конечными продуктами процессов микробной ферментации в толстой кишке являются короткоцепочечные жирные кислоты (КЦЖК): ацетат, пропионат и бутират. Исследования ферментативной активности различных пребиотиков установили наибольшую активность галактоолигосахаридов и лактулозы в способности к стимуляции их образования.

Цель - изучение эффективности смеси с лактулозой в сочетании с галактоолигосахаридами у детей первого года жизни.

Результаты. Бифидогенное действие лактулозы подтверждено в значительном количестве доказательных исследований с участием как детской, так и взрослой категории населения. В исследованиях с участием детей первых месяцев жизни отмечено 100% восстановление уровня бифидобактерий на фоне вскармливания смесью с лактулозой, сравнимое с действием грудного молока. Результаты по выявлению дозозависимого эффекта лактулозы в детском питании противоречивы. Большинство авторов указывают на возможность использования для достижения эффекта даже минимальных доз дисахарида (1 г/сут). Включение 0,5% лактулозы в смеси для искусственного вскармливания считается достаточным для обеспечения бифидогенного эффекта, а 1% - для послабляющего действия.

Другие исследования свидетельствуют об увеличении относительного количества бифидо- и лактобактерий в составе микробиоты кишечника при приеме лактулозы в количестве 3 г/сут. При этом более значимое влияние на уровень как бифидо-, так и лактобактерий, а также на уровень КЦЖК выявлено при потребдении лактулозы в количестве 5 г/сут. По результатам российских исследований, лечебный и профилактический эффекты смеси с лактулозой были выявлены при ее содержании в количестве 0,9 г на 100 мл продукта, включая влияние на микробиом. Так, у 77% детей первого года жизни было показано достоверное увеличение содержания бифидобактерий в сочетании с уменьшением присутствия Staphylococcus aureus.

Новым направлением стало включение в состав смесей для искусственного вскармливания комбинации лактулозы и пребиотиков - олигосахаридов (ГОС и ФОС). Исследование эффективности смеси, содержащей лактулозу в количестве (0,45 г/100 мл) в сочетании с галактоолигосахаридами (0,2 г/100 мл), проведенное в ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии", показало результативность такого подхода. В исследование были включены 40 детей первых месяцев жизни, страдающих запорами. Назначение исследуемой смеси улучшало характер стула в 100% случаев.

Заключение. Лактулоза относится к пищевым ингредиентам - пребиотикам с функциональным потенциалом. Смеси для искусственного вскармливания с включением лактулозы обладают доказанной эффективностью в питании детей, страдающих запорами и нарушениями состояния кишечной микробиоты. Необходимы дальнейшие исследования с целью подтверждения пребиотического влияния смеси с меньшим количеством лактулозы в сочетании с галактоолигосахаридами на микробиом.

Цао Синьлу, Решетова М.С., Зольникова О.Ю., Ивашкин В.Т.

Анализ метаболической активности микробиоты у пациентов с разными стадиями жировой болезни печени, ассоциированной с метаболической дисфункцией

ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-047

Введение. Жировая болезнь печени, ассоциированная с метаболической дисфункцией (МАЖБП), представляет собой одно из ведущих заболеваний печени. Многие исследования подтверждают роль кишечной микробиоты в многофакторном патогенезе МАЖБП.

Цель - изучение на разных стадиях МАЖБП метаболической активности микробиоты кишечника в отношении продукции короткоцепочечных жирных кислот (КЦЖК): ацетата, пропионата, бутирата.

Материал и методы. В исследование включены 79 пациентов с МАЖБП (27 пациентов со стеатозом, 36 - со стеатогепатитом, 16 - с циррозом в исходе МАЖБП) и 20 здоровых лиц (группа сравнения). Уровень и спектр КЦЖК в кале пациентов определяли методом газожидкостной хроматографии.

Результаты. Выявлены однонаправленные изменения метаболической активности микробиоты на стадии стеатоза и цирроза печени в исходе МАЖБП. В сравнении с группой здоровых лиц и другими вариантами повреждения печени при стеатозе наблюдалось повышение доли ацетата (p<0,001), снижение - пропионата и бутирата (p<0,001), тогда как у пациентов на стадии цирроза наблюдалось увеличение доли пропионата и снижение доли бутирата в профиле КЦЖК (p<0,05). По отношению к показателю лиц из группы сравнения уровень изокислот был ниже (p<0,001) и уменьшался при стеатогепатите с низким уровнем КЦЖК и циррозе печени (p<0,05). Выявлены различия в уровне КЦЖК при стеатогепатите: у части пациентов повышение уровня (p<0,001), у части - снижение (p<0,001). Высокий уровень КЦЖК при стеатогепатите коррелировал с менее выраженным фиброзом по результатам расчетных тестов (FIB-4, NFS) и данными эластометрии (p<0,001). У пациентов с повышенным уровнем КЦЖК наблюдался более высокий индекс массы тела (p<0,006), уровень общего холестерина и липопротеинов низкой плотности в сыворотке крови был статистически значимо ниже, чем у пациентов с низким уровнем КЦЖК (p<0,001). В общей сложности уровни КЦЖК и их фракции в образцах стула пациентов положительно коррелировали с уровнями альбумина, мочевой кислоты, активностью аланинаминотрансферазы в сыворотке крови, уровнем гемоглобина, количеством лейкоцитов и тромбоцитов (p<0,05). Отрицательная корреляция наблюдалась с уровнями глюкозы и билирубина, активностью аспартатаминотрансферазы, щелочной фосфатазы (p<0,05), индексами фиброза печени и результатами эластографии (p<0,05).

Заключение. По мере прогрессирования заболевания наблюдается как снижение общего уровня КЦЖК, так и изменение соотношения ацетата, пропионата и бутирата. Предположительно, снижение уровня КЦЖК у пациентов с МАЖБП можно рассматривать как прогностический маркер неблагоприятного течения заболевания печени.

Шевелева С.А., Ефимочкина Н.Р.

Кишечный микробиом как неотъемлемый компонент современной концепции здоровья

ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии", Москва, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-048

Сбережение здоровья населения является главным приоритетом здравоохранения и национальной безопасности РФ. По данным научных публикаций и результатам обследований различных групп населения, распространенность дисбактериоза кишечника беспрецедентно широка: у пациентов с больных неинфекционными заболеваниями гастроэнтерологического, гинекологического, урологического, дерматологического, педиатрического профиля она достигает 80-100%, а при отсутствии клинических проявлений, в том числе у лиц трудоспособного возраста и молодежи - 60-75%.

Нормальный стабильно функционирующий кишечный микробиом признан неотъемлемым фактором поддержания постоянства внутренней среды организма, характерного для полного здоровья. Однако условия и ритм жизни современного человека все более способствуют возрастанию числа дизрупторов нормальной микробиоты, таких как употребление рафинированных, глубоко переработанных продуктов с низким содержанием пищевых волокон и биологически активных веществ, применение антибиотиков в медицине и сельском хозяйстве. Высокая частота дисбиозов также связана с широким распространением формирующихся в раннем онтогенезе нарушенных метаболических фенотипов нормофлоры.

В ФГБУН "ФИЦ питания и биотехнологии" проведены исследования по системной оценке влияния эндогенных и экзогенных факторов на процессы становления кишечной микробиоты у детей, которая позволила охарактеризовать в качестве ведущей детерминанты ее длительных персистирующих нарушений нутритивный фактор, а именно: искусственное вскармливание, способствующее формированию в раннем постнатальном периоде нарушенного профиля короткоцепочечных жирных кислот (КЦЖК), нефизиологичной сукцессии видов актинобактерий, повышению доли провоспалительных таксонов флоры и низкому альфа-разнообразию, что свойственно для обезогенного фенотипа микробиоты кишечника и неблагоприятно в плане развития метаболических расстройств во взрослой жизни.

Впервые проведен анализ состояния кишечного микробиома человека во взаимосвязи с его функцией в макроорганизме, направленной на обеспечение нутриома, и факторов, определяющих адекватный пищевой статус. Постулированы требования к кишечному микробиому (взаимодействие с хозяином по принципу мутуализма, обеспечение иммунного баланса с макроорганизмом за счет правильного формирования мукозального иммунитета, осуществление метаболических и регуляторных функций без потерь для нутриома) и принципиально новый комплекс его показателей у здоровых взрослых людей, основанный на индикаторах морфологии и функциональной активности сообщества, в том числе демонстрирующих состояние локального иммунитета, а также КЦЖК как системных регуляторов деятельности органов и систем.

Обоснованы принципы и пути поддержания и коррекции кишечного микробиома, заключающиеся в соблюдении микроэкологической направленности питания с рождения и на протяжении всей жизни, а именно: максимальная поддержка грудного вскармливания; при искусственном вскармливании - создание смесей для питания детей 1-2-го года жизни, отвечающих критерию бифидогенности по белковому, углеводному и жировому компонентам; у детей старше 3 лет и взрослых - долговременная профилактика, направленная на обеспечение оптимального профиля КЦЖК в кишечнике за счет потребления сбалансированных по пищевым веществам и энергии, максимально разнообразных рационов, в том числе включающих специализированные пищевые продукты на основе смесей растительных полисахаридов, пребиотиков, полифенолов и флавоноидов, кисломолочные и сквашенные продукты как источники дополнительных экзогенных ферментов и частично расщепленного белка.

В настоящее время проводятся метагеномные исследования, направленные на изучение взаимосвязей кишечного микробиома с питанием и формированием нутритивного статуса человека, в том числе при ряде алиментарно-зависимых заболеваний, таких как синдром раздраженного кишечника, а также при преморбидных состояниях, характеризуемых как факторы риска развития сердечно-сосудистой патологии (дислипидемии, ожирение). Для выполнения анализов используются NGS-методы в системе высокопроизводительного полупроводникового секвенирования на платформе Ion Torrent.

Продолжается работа по развитию методических подходов для оценки состава кишечной микробиоты у лиц с различными алиментарно-зависимыми заболеваниями, в том числе путем совершенствования культуральной анаэробной техники, метагеномного анализа, современных методов статистического анализа корреляций паттернов питания со спецификой дисбиотических сдвигов, характерных для определенных алиментарно-зависимых патологий.

Основными задачами планируемых научных исследований являются:

- разработка программ ранней диагностики дисбиозов кишечника и их персонифицированной коррекции, профилактики заболеваемости неинфекционными алиментарно-зависимыми заболеваниями и их осложнений у детей и взрослых;

- дополнение концепции здорового питания принципом микроэкологической направленности питания для сохранения оптимального кишечного микробиома с рождения и на протяжении всей жизни у россиян;

- создание новой медицинской технологии персонализированной оптимизации кишечного микробиома;

- разработка принципов и алгоритма доклинических и клинических доказательств эффективности специализированных пробиотических пищевых продуктов в моделях ex vivo, in vivo и исследованиях с участием людей (стратифицированных популяций) для включения в единую систему допуска специализированных пищевых продуктов в питание населения.

Шеенкова М.В., Яцына И.В.

Функциональные заболевания органов пищеварения медицинских работников: распространенность, возможности терапии

ФБУН "ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана" Роспотребнадзора, Мытищи, Московская область, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-049

Введение. Состояние здоровья профессиональной группы работников здравоохранения - это обеспечение высокой работоспособности, восстановление утраченных функциональных резервов. К факторам профессиональной вредности работников здравоохранения относится напряженность трудового процесса, которая способствует развитию функциональных заболеваний органов пищеварения.

Цель - анализ результатов периодического медицинского осмотра (ПМО) работников с изучением эффективности применения пробиотиков для коррекции функциональных заболеваний органов пищеварения.

Материал и методы. В рамках обязательного ПМО обследованы 286 работников здравоохранения (женщин) в возрасте от 28 до 60 лет со стажем работы от 3 до 28 лет. Выявлены 42 (14,7%) сотрудника с признаками функциональных заболеваний органов пищеварения [функциональная диспепсия (ФД), синдром раздраженного кишечника (СРК)]. Пациенты с ФД и СРК были случайным образом разделены на 2 группы: 1-я группа (20 человек) получала пробиотик из бифидобактерий бифидум однокомпонентный сорбированный по стандартной схеме, 2-я группа (22 человека) - плацебо. Группы были сопоставимы по возрасту и стажу работы. Контрольное обследование проведено через 14 дней. Статистическую значимость различий между группами после терапии оценивали с применением критерия χ² Пирсона. Критический уровень значимости (p) был 0,05.

Результаты. Через 14 дней в группе пациентов, принимавших пробиотики, симптомы ФД и СРК отсутствовали у 11 (55%) человек. При повторном обследовании среди пациентов группы сравнения улучшение состояния отмечено у 4 (18,2%) человек. Таким образом, выявлено статистически значимое различие доли пациентов с ФД, СРК среди обследованных основной группы и группы сравнения при повторном обследовании, свидетельствующее об эффективности применения пробиотиков при функциональных заболеваниях органов пищеварения у медицинских работников.

Заключение. Значительная частота функциональных заболеваний органов пищеварения среди медицинских работников, сопоставимая с распространенностью среди взрослого населения РФ, диктует необходимость совершенствования лечебно-профилактических мероприятий. Использование пробиотиков эффективно для коррекции симптомов ФД и СРК в профессиональной группе работников здравоохранения.

Шинкарев С.М.¹, Зимин В.В.², Саргин Б.В.¹

Исследование влияния ультразвука на рост лактобактерий при промышленном культивировании

¹ ООО "БИГ", Москва, Российская Федерация

² ООО "Обл-Био", п. Оболенск, г.о. Серпухов, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-050

Введение. При промышленном производстве пробиотических препаратов и заквасок актуальной задачей является оптимизация и ускорение процесса ферментации, совершенствование условий производства, а также наибольший выход целевого продукта за меньшее количество циклов.

Цель - исследование влияния ультразвука на рост лактобактерий при промышленном культивировании.

Материал и методы. Исследования проводили с использованием бактерий L. acidophilus, L. delbrueckii и L. casei. Применяли питательные среды, рекомендованные Всероссийской коллекцией промышленных микроорганизмов для данных микроорганизмов. Культивирование проводили в ферментере BioFlo объемом 7 л с автоматическим термостатированием и поддержанием pH и контролем воздухообмена. Для обработки ультразвуком использовали выносную ультразвуковую ячейку с установленной удельной мощностью 300 Вт/л при 28 кГц. Контроль - без обработки ультразвуком. Контроль скорости роста вели по накоплению бактерий через 18, 21 и 24 ч. Титр клеток бактерий определяли по ГОСТ 10444.11-2013 "Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных".

Результаты. Титры бактерий в экспериментальных и контрольных образцах представлены в таблице.

Использование ультразвука увеличивает скорость накопления бактериальной массы L. acidophilus и L. delbrueckii и позволяет достичь целевого титра за более короткий период, что способствует оптимизации технологических процессов на производстве: сокращению времени производственного цикла и снижению энерго- и трудозатрат.

Заключение. Целесообразно использование ультразвуковой обработки в производстве пробиотических культур и заквасок, а также проведение дальнейших исследований влияния ультразвука на рост бактерий при культивировании других промышленных микроорганизмов.

Шитикова Е.Д.

Коррекция микробиоты кишечника при ожирении: обзор текущих данных и перспектив

ФГБОУ ВО СПбГПМУ Минздрава России, Санкт-Петербург, Российская Федерация

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-051

Введение. В последнее время все больший интерес вызывает исследование вклада кишечной микробиоты в развитие ожирения и его осложнений, которые являются серьезной проблемой современного здравоохранения и ассоциированы с высокой заболеваемостью и смертностью. Доказано участие микробиоты в энергетическом обмене и активации ряда ферментов, способствующих липогенезу и отложению жира в адипоцитах; регуляции уровня гастроинтестинальных гормонов и лептина. Ожирение сопровождается хроническим воспалением слабой степени и активацией иммунной системы, с которыми связаны инсулинорезистентность и метаболический синдром [1]. Выявлены изменения в составе микробиома кишечника у лиц с ожирением: снижение альфа-разнообразия и изменение соотношения Firmicutes/Bacteroidetes в пользу повышения уровней Firmicutes. Коррекция кишечной микробиоты является многообещающей перспективой в качестве дополнения к терапии ожирения и его осложнений.

Цель - анализ различных методов коррекции состава кишечной микробиоты у пациентов с ожирением, анализ перспектив данной области исследований.

Материал и методы. Проведен критический анализ данных обзоров, систематических обзоров, метаанализов и рандомизированных контролируемых исследований по проблеме исследования в отечественных и зарубежных источниках (eLibrary.ru, PubMed).

Результаты. Основными методами коррекции кишечной микробиоты, применяемыми в клинической практике в терапии ожирения и ассоциированных с ним заболеваний, являются как медикаментозные, так и немедикаментозные. В качестве медикаментозных методов применяются как устоявшиеся, так и относительно новые и экспериментальные методы. К первым можно отнести прием пробиотиков, пребиотиков, синбиотиков, метабиотиков. Ко вторым - трансплантацию фекальной микробиоты, прием добавок на основе микроорганизма Akkermansia muciniphila, применение бутирата (короткоцепочечной жирной кислоты, продуцируемой кишечной микробиотой), использование добавок ресвератрола (полифенол), резистентного крахмала. Кроме того, необходима коррекция микробиоты после выполнения бариатрических хирургических операций. В качестве немедикаментозных методов применяются различные варианты диет, физическая активность, ограничение приема пищи.

Заключение. Ожирение связано с изменениями в составе микробиома кишечника. Подтверждена эффективность различных терапевтических подходов, включая медикаментозную терапию; хирургические вмешательства и немедикаментозные методы лечения, такие как диета и физическая активность, в устранении осложнений, связанных с ожирением. Текущие исследования направлены на выявление новых методов модуляции микробиоты кишечника у людей с ожирением с целью улучшения показателей здоровья. Эти усилия направлены на разработку более целенаправленных и персонализированных подходов к лечению ожирения, которые в перспективе могут привести к улучшению результатов лечения пациентов и снижению затрат здравоохранения.

Литература

1. Корниенко Е.А., Нетребенко О.К. Ожирение и кишечная микробиота: современная концепция взаимосвязи // Педиатрия. Журнал им. Г.Н. Сперанского. 2012. Т. 91, № 2. С. 111-122.

Nyambal T.¹, Lkhamsuren Kh.¹, Hübner A.², Bromage S.³, Stahl R.², Byambatsogt G.⁴, Chimeddorj B.⁴, Dambadarjaa D.¹, Tulgaa Kh.⁵, Warinner Ch.², Tsolmon S.⁶

The bifidobacterium group in Mongolian’s gut

¹ Mongolian National University of Medical Science, School of Public Health

² Max Planck Institute for for Evolutionary Anthropology

³ Harvard T. H. Chan School of Public Health, Harvard University

⁴ Mongolian National University of Medical Science, School of Biomedicine

⁵ Mongolian National University of Medical Science, Clinic Molecular Diagnostic Center

⁶ Department of Anthropology, Harvard University

DOI: https://doi.org/10.33029/0042-8833-2024-93-3s-052

Introduction. The gut microbiome is composed of an immense diversity of microorganisms [1] and recent studies have shown their essential roles in host health. The genus Bifidobacterium represents the deepest branching lineage within the phylum Actinobacteria, and currently comprises 94 recognized subspecies [2, 3]. Bifidobacteria are divided into 10 groups based on their role, diet, and habitat. There are B. adolescentis, B. asteroides, B. bifidum, B. bombi, B. boum, B. longum, B. pseudolongum, B .pullorum, B. psychraerophilum and B.tissieri group [4]. We aimed to determine the species diversity of bifidobacteria from Mongolian gut.

Material and methods. A total of 100 urban and rural people were included in the research. Genome sequencing of the microbiome determined using an Illumina NGS equipment. Data analysis was performed using the R statistical program. All bacterial cultures were ten-fold diluted in 0.9% NaCl to a concentration of approximately 10² CFU/mL. Then, the selected dilutions were pour-plated in duplicate in the following selective culture media. Bifidobacterium colonies was grow within 24-48 hours in 37 ^oC in an anaerobic [5].

Results. 13 species of Bifidobacterium were detected in 100 human samples, and species of B. adolescentis, B. angulatum, B. longum, B. bifidum, B. catenulatum B. dentium and B. breve were dominantly detected in rural people. Species of B. pseudocatenulatum, B. ruminantium, B. animalis, B. scardovii and B. kashiwanohense were found to be predominant in urban people. The Bifidobacterium species composition of rural people was 2.9 times higher than urban people. Dietary questionnaires have shown that this is related to people’s consumption of milk and dairy products. B. adolescentis was dominant in all samples and was found in 87% of all samples. In terms of abundance, B. angulatum is 35.3 times higher in rural residents than in urban; and B. catenulatum is 44.8 times higher, which is directly related to the living area and dietary pattern. B. longum was detected in 93% of all individuals. We were found 2-3 types of colonies in most samples of the bifidobacteria cultured in selective media.

Conclusion. Bifidobacterium infant group accounted for 38.3% and adult group for 61.7%. As a result of the study, 7 subspecies of B. adolescentis group, 3 subspecies of B. longum group, 2 subspecies of B. bifidum group, and 1 subspecies of B. pseudolongum group were detected.

References

1. Arumugam M., Raes J., Pelletier E., Le Paslier D., Yamada T., Mende D.R. et al. Enterotypes of the human gut microbiome // Nature. 2011. Vol. 473, N 7346. Р. 174-180. DOI: https://doi.org/10.1038/nature09944. Erratum in: Nature. 2011. Vol. 474, N 7353. Р. 666. Erratum in: Nature. 2014. Vol. 506, N 7489. Р. 516.
2. Neuzil-Bunesova V., Lugli G.A., Modrackova N., Vlkova E., Bolechova P., Burtscher J. et al. Five novel bifidobacterial species isolated from faeces of primates in two Czech zoos: Bifidobacterium erythrocebi sp. nov., Bifidobacterium moraviense sp. nov., Bifidobacterium oedipodis sp. nov., Bifidobacterium olomucense sp. nov. and Bifidobacterium panos sp. nov. // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2021. Vol. 71, N 1. DOI: https://doi.org/10.1099/ijsem.0.004573
3. Ventura M., Canchaya C., Tauch A., Chandra G., Fitzgerald G.F., Chater K.F., et al. Genomics of Actinobacteria: tracing the evolutionary history of an ancient phylum. Microbiol Mol Biol Rev. 2007. Vol. 71, N 3. Р. 495-548. DOI: https://doi.org/10.1128/MMBR.00005-07
4. Alessandri G., van Sinderen D., Ventura M. The genus bifidobacterium: From genomics to functionality of an important component of the mammalian gut microbiota running title: Bifidobacterial adaptation to and interaction with the host // Comput. Struct Biotechnol J. 2021. Vol. 19. Р. 1472-1487. DOI: https://doi.org/10.1016/j.csbj.2021.03.006
5. Nelson K.E., Weinstock G.M., Highlander S.K., Worley K.C., Creasy H.H., Wortman J.R., et al. Human Microbiome Jumpstart Reference Strains Consortium. A catalog of reference genomes from the human microbiome. Science. 2010. Vol. 328. Р. 994-999. DOI: https://doi.org/10.1126/science.1183605